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离心去除冻存液:
融解好的细胞迅速放进离心机中,2000r/min或者500g离心2min。吸弃上清液。
用8ml完全培养基重悬细胞,吹打制成单细胞悬液,细胞浓度以5 105/ml为宜。
将复苏好的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内,8-24小时后换液继续培养培养,换液的时间由细胞生长情况而定。
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冻存细胞复苏操作步骤:
实验前准备:将水浴锅预热至37℃。用75%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。
在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等。
迅速解冻:迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使管中的液体迅速融化,时间控制在1分钟左右。
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